增菌培養(yǎng)物實(shí)驗(yàn)樣品鏡檢高倍光學(xué)顯微鏡
增菌培養(yǎng)物，按以下步驟進(jìn)行操作。
(1)涂片 取一接種環(huán)上述培養(yǎng)物涂布于潔凈載玻片上，并在左上
角編號(hào)，室溫干燥。
(2)加沙門氏菌多價(jià)O血清和桿菌肽 上述玻片標(biāo)本上各滴加沙門
氏菌多價(jià)O血清工作稀釋液1滴，立即加入1滴桿菌肽溶液
鏡檢與結(jié)果
上述玻片標(biāo)本，以高倍顯微鏡觀察結(jié)果。在檢樣中如有沙門氏菌
存在，菌形呈紡錘形，其大小比原菌大2～4倍，以橫徑膨脹更為明顯
。菌體呈鮮艷藍(lán)色，有些菌體為兩極濃染。菌體壁變薄，有扁平感，
失去很強(qiáng)的折光性。視野中未發(fā)現(xiàn)免疫染色特征的菌株者，被檢樣品
中未發(fā)現(xiàn)沙門氏菌。對(duì)比沙門氏菌使用免疫染色法處理的標(biāo)本，具有
免疫染色的特征，非沙門氏菌的對(duì)比免疫染色，無此特征。普通染色
液染色的沙門氏菌，具有該染色液染色的特征，菌體刁；膨脹，體壁
與折光性無異常。
熒光抗體法
主要儀器和試劑
(1)顯微鏡玻片 無自發(fā)熒光，厚度0．8～1．2mm，在玻片的一面
刻有號(hào)碼及8個(gè)方格(上下兩列，每列：格)。每次使用前，必須用洗滌
劑徹底除盡油污，并擦洗干凈，經(jīng)滴水檢查，確實(shí)無油污后方可使用
。
(2)熒光顯微鏡 熒光顯微鏡由電器和燈室兩部分組成，油浸暗視
野集光器系統(tǒng)。國(guó)產(chǎn)有超高壓汞燈熒光光源裝置和高色溫溴鎢燈熒光
顯微光源裝置，配有一架普通顯微鏡即可使用。
熒光抗體試劑必須低溫保存(4℃左右)，稀釋后的試劑，應(yīng)分成小
批，冰凍貯存。在每批試劑首次使用前，或稀釋并存放較長(zhǎng)時(shí)間后，
應(yīng)用幾個(gè)不同抗原的已知沙門氏菌測(cè)定試劑的效價(jià)，并確定或校正其
工作滴度。染色效價(jià)，即能使所染菌株呈4+熒光強(qiáng)度的最大稀釋倍數(shù)
，低于染色效價(jià)一個(gè)滴度的試劑稀釋倍數(shù)，為其工作淌度。
