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如何快速判斷顯微鏡視野面積并統(tǒng)計(jì)其中細(xì)胞




來源:責(zé)任編輯:yiyi
時間:2011-7-4 10:39:28

如何快速判斷顯微鏡視野面積并統(tǒng)計(jì)其中細(xì)胞
方法一:
根據(jù)文獻(xiàn)的參考標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù),一般是高倍鏡下(x400)或(x200)隨機(jī)選取幾個視野,計(jì)數(shù)一定量的細(xì)胞,爭取做到能反映切片的全貌;也有專門的計(jì)數(shù)軟件,需要先選取視野攝像,然后通過軟件處理。
視野面積==顯微鏡目鏡的視場數(shù) / 物鏡的放大倍數(shù),
例如OLYMPUS的目鏡的視場數(shù)為22,那么10X物鏡下的視野面積為直徑為
2.2mm。
而20X的視野面積為1.1mm
關(guān)于免疫組化表達(dá)陽性的細(xì)胞,現(xiàn)在多數(shù)使用IPP軟件進(jìn)行實(shí)現(xiàn)

方法二:你可以使用網(wǎng)格計(jì)數(shù),利用體視學(xué)方法進(jìn)行計(jì)數(shù)細(xì)胞的面積,根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)所占的網(wǎng)格數(shù)目多少,一個網(wǎng)格的面積大小根據(jù)不同的網(wǎng)格來判定,這樣你就可以初步得出陽性細(xì)胞數(shù)的面積大小,具體方法你可以在維譜網(wǎng)上搜索“網(wǎng)格計(jì)數(shù)”就可以了。

方法三:是本人一些小經(jīng)驗(yàn)
一個相對簡單的方法:

1、用一個顯微鏡下的標(biāo)尺(也可以用一個檢驗(yàn)科人工計(jì)算細(xì)胞的計(jì)數(shù)板),拍照,然后根據(jù)標(biāo)尺的大小,計(jì)算出一個視野的面積(可以放大后打印出來,然后計(jì)算一張照片的大小,應(yīng)該說用一般的尺子加上簡單的數(shù)學(xué)計(jì)算就可以得出來);
2、然后同等條件(放大倍數(shù)相同即可)下用數(shù)碼相機(jī)照像,電腦上數(shù)陽性細(xì)胞的個數(shù),除以面積即可得出結(jié)果。

當(dāng)然,如果有圖像分析軟件,第一步用電腦完成就更為準(zhǔn)確和簡單了。

相關(guān)資訊:相差顯微鏡在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

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