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使用顯微鏡定位器克隆細(xì)胞精確定位訣竅




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時(shí)間:2011-7-12 9:51:19

怎樣使用顯微鏡定位器克隆細(xì)胞精確定位 (本文由顯微鏡報(bào)價(jià)網(wǎng)審核通過(guò))
首先是這樣在倒置顯微鏡挑克隆的細(xì)胞的
1 讓單克隆細(xì)胞長(zhǎng)到比較大的集落大概100個(gè)左右吧,在倒置顯微鏡下用標(biāo)記筆在孔板底標(biāo)出待挑克隆的位置---就是一個(gè)小黑點(diǎn)。

2 吸取培基用D-Hanks洗后有兩種挑法。
第一是胰酶消化法:方法是用10ul的移液槍吸取大概6ul左右的胰酶滴在標(biāo)記的黑點(diǎn)(單克隆)上面,大概10秒鐘后,
用移液槍吸取胰酶反復(fù)吹打幾次,將胰酶消化產(chǎn)物移入24孔板中。

第二種方法與挑細(xì)菌的單克隆有點(diǎn)相似,用一個(gè)200ul tip頭對(duì)著標(biāo)記的黑點(diǎn)直接刮取,將刮取產(chǎn)物移入24孔板中。

挑完后于倒置顯微鏡下觀察集落轉(zhuǎn)移情況。個(gè)人總結(jié)覺(jué)得第一種方法較好!

在顯微鏡下用記號(hào)筆從下面就可以標(biāo)記出你的克隆的位置;

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