共焦點(diǎn)熒光顯微鏡與普通熒光顯微鏡相比,有一下優(yōu)點(diǎn):
1、多重染色
1)多重染色時(shí),各染料之間的cross-talk較少。 2)可使用Cy5染料 Cy5的激發(fā)波長(zhǎng)是645nm, 熒光emission波長(zhǎng)是670-680nm, 人眼的可見光 波長(zhǎng)是390-750nm.
2、Z軸上的分解能高。 1)可了解組織的3D結(jié)構(gòu)。
2)可觀查被染上熒光的物質(zhì)在細(xì)胞里的分布:例如,是在細(xì)胞膜上還是在細(xì)胞核里。
3)即使組織標(biāo)本較厚,也可獲得鮮明的畫像。
3、高畫質(zhì) 1)通過調(diào)節(jié)pin-hole,不但可提高Z軸上的分解能,也可提高X-Y軸上的分解能。 2)可以在光學(xué)和電子兩個(gè)水平調(diào)節(jié)對(duì)比度,因此可以從低對(duì)比度組織標(biāo)本,拍攝到高對(duì)比度的圖像。
注意點(diǎn): (1)注意調(diào)節(jié)Koehler illumination (2)與普通熒光顯微鏡一樣,注意濾色鏡的選擇
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