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熒光顯微鏡在各領(lǐng)域中的應(yīng)用都非常廣泛，在植物細(xì)胞的觀察研究中，通過染色可以更清晰地觀測(cè)到細(xì)胞的形態(tài)及結(jié)構(gòu)。在實(shí)驗(yàn)匯總發(fā)現(xiàn)，熒光顯微鏡還可以直接（不做任何處理）觀察植物葉的氣孔器，而且能觀察到氣孔的變化情況，為熒光顯微鏡找到了一種新用途。
熒光顯微鏡是利用特定波長(zhǎng)的光照射被檢測(cè)物體長(zhǎng)生熒光進(jìn)行鏡檢的顯微光學(xué)觀測(cè)儀器。
1. 熒光顯微鏡在各領(lǐng)域的應(yīng)用
（1） 熒光顯微鏡的應(yīng)用包括一般熒光染色和免疫熒光染色方法，熒光染色方法可以顯示細(xì)胞內(nèi)的各種成分，特別是對(duì)細(xì)胞內(nèi)的兩種核酸（DNA或RNA）及酸性粘多糖有較強(qiáng)的特異性和熒光方法的敏感性，作為一種良好的細(xì)菌化學(xué)方法。免疫熒光方法是把免疫學(xué)的特異性和熒光方法的敏感性，作為一種研究方法或?qū)嶒?yàn)手段，廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)各種基礎(chǔ)理論研究和臨床診斷，如組織細(xì)胞學(xué)，微生物學(xué)，寄生蟲學(xué)，病理學(xué)的研究以及自身免疫病診斷。20世紀(jì)30年代熒光染色即已用于細(xì)菌、霉菌等微生物及細(xì)胞、纖維等的形態(tài)觀察和研究。40年代創(chuàng)造了熒光燃料標(biāo)記蛋白質(zhì)的技術(shù)，這種技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于免疫熒光抗體染色的常規(guī)技術(shù)中，可檢查和定位病毒、細(xì)菌、霉菌、原蟲、寄生蟲及動(dòng)物和人的組織抗原與抗體，可用以探討病因及發(fā)病機(jī)理，如腎小球疾病的分類及診斷等。
（2） 熒光顯微鏡在植物研究中的應(yīng)用也非常廣泛。利用某些物質(zhì)在短光波照射下即可發(fā)生熒光的特性，對(duì)植物細(xì)胞用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察研究。如細(xì)胞內(nèi)大部分脂質(zhì)和蛋白質(zhì)經(jīng)照射均可發(fā)出淡藍(lán)色熒光，而葉綠體發(fā)出火紅色熒光。但大部分物質(zhì)仍需要用熒光燃料（如吖啶橙、異硫氰酸熒光素等）染色后，在短光波照射下才能發(fā)出熒光。如線粒體、微管等細(xì)胞器，在普通光學(xué)顯微鏡下很難觀測(cè)到，而通過染色及熒光標(biāo)記后，就能夠很清晰的進(jìn)行觀測(cè)研究�，F(xiàn)在在植物細(xì)胞凋亡機(jī)理的研究中對(duì)線粒體進(jìn)行染色后，用熒光顯微鏡能夠很清晰地觀察到活細(xì)胞核呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。利用熒光標(biāo)記技術(shù)顯示微管，可以在多種植物生殖細(xì)胞內(nèi)清楚地看到微管骨架的存在。
2. 植物觀察中的新用途
在熒光顯微鏡的管理和使用中發(fā)現(xiàn)。用熒光顯微鏡可以直接觀察植物葉表皮的氣孔。為熒光顯微鏡找到了一種新的用途。具體方法如下：
（1） 打開電源開關(guān)，與此同事，電源指示綠燈點(diǎn)亮，點(diǎn)燃2~3min后，光線將穩(wěn)定。
（2） 燈位調(diào)中，落射式熒光顯微鏡在物鏡轉(zhuǎn)換器上裝上定心屏調(diào)節(jié)燈位中心。
a. 打通光路，將光路中擋光板放在光完全通過的位置。
b. 視場(chǎng)光闌“F”和孔徑光闌“A”旋到較大位置。
c. 將物鏡旋出光路；并從物鏡轉(zhuǎn)換器上拆一個(gè)防塵帽蓋，裝上定心屏，就在定心屏上出現(xiàn)弧形圖角或其他圖像。
d. 用調(diào)焦柄（在燈室前）對(duì)弧形進(jìn)行調(diào)節(jié)，使其達(dá)較清楚，并通過燈泡調(diào)中螺絲對(duì)弧形調(diào)中。
（3） 熒光觀察：為防止紫外線進(jìn)入人的眼睛，在鏡檢中必須使用UV遮光罩。使用遮光板遮擋可見光。
3. 結(jié)論
在紫外光激發(fā)下，葉綠體發(fā)出火紅色熒光，氣孔發(fā)綠色熒光，保衛(wèi)細(xì)胞呈黃色或黃綠色，且形狀大小非常清晰，兩保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)的火紅色葉綠體則環(huán)繞氣孔排成一圈。表皮細(xì)胞內(nèi)的葉綠體數(shù)量要比葉肉細(xì)胞少，所以在熒光顯微鏡下看不到表皮細(xì)胞。通過大量試驗(yàn)證明，單子葉，雙子葉，裸子植物大都適用于這種方法而且效果較好。
熒光顯微鏡的這一用途，在觀察植物葉片氣孔的形態(tài)、密度、開閉程度等方面，操作方法簡(jiǎn)單，即節(jié)省時(shí)間又節(jié)約經(jīng)費(fèi)，且觀察效果好。
本文關(guān)鍵詞：熒光顯微鏡，新用途
原文地址:http://www.bqct.com.cn/news/201147101326.htm
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